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        論文編號 202206-11
        論文題目 1,25(OH)2D3通過細胞焦亡經典途徑促進Min6細胞胰島素分泌的機制研究
        文獻類型
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        1,25(OH)2D3通過細胞焦亡經典途徑促進Min6細胞胰島素分泌的機制研究

        首發時間:2022-06-14

        鄭羽旋 1   

        鄭羽旋(1997-),女,碩士研究生,主要研究方向:動物模型

        魏迅 1    張樂文 1    胡宇蝶 1    周正宇 1   

        周正宇(1973-),男,副教授,碩導,主要研究方向:糖尿病分子機制、動物模型與比較醫學研究

        • 1、蘇州大學蘇州醫學院實驗動物中心,蘇州 215000

        摘要:目的探究1,25(OH)2D3對DM胰腺細胞焦亡的作用機制研究。 方法不同濃度1,25(OH)2D3(5×10-6、5×10-7、5×10-8、5×10-9 mmol/L)干預Min6細胞24 h后檢測細胞活性;GSDMD siRNA轉染前后Min6 細胞(NC組和siRNA組)分別經STZ處理后(STZ組和siRNA-STZ組)建立糖尿病細胞模型,再以1,25(OH)2D3干預各實驗組(NC-VD組、STZ-VD組、siRNA-VD組、siRNA-STZ-VD組);ELISA試劑盒檢測各組細胞上清胰島素分泌情況;乳酸脫氫酶試劑盒檢測各組細胞上清LDH釋放情況;ELISA檢測各組細胞上清炎癥因子IL-18、L-1β釋放情況;Western Blot檢測各組細胞焦亡相關蛋白(NLRP3、NF-κB、caspase-1、GSDMD)表達情況。 結果 STZ處理后造成細胞功能損傷,胰島素分泌含量顯著性下降(p<0.001),且上調NLRP3、NF-κB、caspase-1、GSDMD蛋白表達(p<0.01),促進炎癥因子IL-18、IL-1β以及LDH的釋放,誘導細胞焦亡的發生(p<0.01);1,25(OH)2D3干預后提高胰島素分泌(p<0.001),下調細胞NLRP3、NF-κB、caspase-1、GSDMD蛋白表達(p<0.001),降低炎癥因子IL-18、IL-1β以及LDH的釋放(p<0.01);抑制GSDMD蛋白的表達能夠下調相關蛋白的表達水平,阻礙細胞質膜上的孔洞形成,抑制細胞焦亡的發生,降低炎癥級聯反應的擴大。 結論 STZ能造成胰腺細胞損傷,誘導細胞焦亡的發生,而1,25(OH)2D3可有效緩解STZ造成的細胞損傷,抑制細胞焦亡的發生。

        關鍵詞: 1,25(OH)2D3 糖尿病 細胞焦亡 炎癥 Min6細胞

        For information in English, please click here

        1,25(OH)2D3 promotes insulin secretion in Min6 cells through the canonical pyroptosis pathway

        ZHENG Yuxuan 1   

        鄭羽旋(1997-),女,碩士研究生,主要研究方向:動物模型

        WEI Xun 1    ZHANG Lewen 1    HU Yudie 1    ZHOU Zhengyu 1   

        周正宇(1973-),男,副教授,碩導,主要研究方向:糖尿病分子機制、動物模型與比較醫學研究

        • 1、Center of Laboratory Animal, Medical College of Soochow University, Suzhou, China, 215000

        Abstract:In this paper we explore the mechanism of 1,25(OH)2D3 on the pyroptosis of T2DM pancreatic cells. Different concentrations(5×10-6,5×10-7,5×10-8,5×10-9 mmol/L) of 1,25(OH)2D3 interfered with Min6 cells for 24 hours and the cell viability was detected. Before and after GSDMD siRNA transfection(NC group and siRNA group), Min6 cells were treated with STZ(STZ group and siRNA-STZ group) to establish diabetic cell models, and then 1,25(OH)2D3 was used to intervene in each experimental group(NC-VD group, STZ-VD group, siRNA-VD group, siRNA-STZ-VD group). ELISA kit was used to detect the secretion of insulin from cell supernatant in each group; Lactate dehydrogenase kit was used to detect the release of LDH in the cell supernatant of each group; ELISA kit was used to detect the release of inflammatory factors IL-18 and IL-1β in the cell supernatant of each group; Western Blot was used to detect the expression of pyroptosis-related proteins(NLRP3, NF-κB, caspase-1, GSDMD). Results: STZ treatment caused cell function damage, and insulin secretion content decreased significantly(p<0.001). The protein expression of NLRP3, NF-κB, caspase-1 and GSDMD were upregulated(p<0.01),the expression of the inflammatory factors IL-18、IL-1β were upregulated and the release of LDH was upregulated; 1,25(OH)2D3 intervention can reduce cell damage and increase insulin secretion of the damaged cells(p<0.001), downregulated the protein expression of NLRP3, NF-κB, caspase-1, and GSDMD(p<0.001), reduce the release of inflammatory factors IL-18、IL-1β, and LDH(p<0.01). Inhibiting the expression of GSDMD protein can downregulate the expression level of related proteins, hinder the formation of pores in the plasma membrane of the cell, inhibit the occurrence of cell pyrolysis, and reduce the expansion of the inflammatory cascade. Conclusion: STZ can cause pancreatic cell damage and induce pyroptosis, while 1,25(OH)2D3 intervention can alleviate the cell damage caused by STZ and inhibit the occurrence of pyroptosis.

        Keywords: 1,25(OH)2D3 Diabetes Pyroptosis Inflammation Min6 cell

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        導出參考文獻

        .txt .ris .doc
        鄭羽旋,魏迅,張樂文,等. 1,25(OH)2D3通過細胞焦亡經典途徑促進Min6細胞胰島素分泌的機制研究[EB/OL]. 北京:中國科技論文在線 [2022-06-14]. http://www.compxwaterloo.net/releasepaper/content/202206-11.

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